Questo kit utilizza la tecnologia di amplificazione dell'acido nucleico isotermico che opera a temperatura ambiente e un intervallo di temperatura costante (in genere 39 gradi -42 gradi). Il processo inizia con la trascrittasi inversa che sintetizza il DNA complementare (cDNA) dai modelli di RNA usando primer specifici. Il complesso formato da ricombinasi e primer, aiutato da proteine ausiliarie e proteine leganti a filo singolo, cerca e si lega al dominio di omologia target. Ciò si traduce nella formazione di una regione del loop D nel sito omologa, iniziando lo scambio di fili. Una volta che la ricombinasi si dissocia, la polimerasi si lega all'estremità 3 'del primer, iniziando l'estensione della catena. Il kit utilizza anche l'attività dell'esonucleasi e le sonde molecolari specifiche per il monitoraggio in tempo reale del processo di amplificazione attraverso le apparecchiature di rilevamento della fluorescenza.
【Caratteristiche】
Elevata sensibilità
Progettato per un'amplificazione precisa dell'RNA, garantendo un rilevamento accurato.
Veloce
La reazione si completa in soli 20 minuti, offrendo una rapida amplificazione.
Stabile
Il formato polvere secco semplifica la manipolazione e lo stoccaggio.
Ampia compatibilità
Compatibile con una gamma di strumenti quantitativi quantitativi di fluorescenza, amplificatori di fluorescenza a temperatura costante e altri dispositivi di rilevamento della fluorescenza.
【Design di primer】
Per prestazioni ottimali, i primer dovrebbero essere lunghi 30-35 bp. Primer più brevi possono influire sulla velocità e la sensibilità dell'amplificazione. I primer sono progettati per evitare strutture secondarie che possono ostacolare il processo di amplificazione. La lunghezza dell'amplicone consigliata è compresa tra 150 e 500 bp.
【Design della sonda fluorescente】
La sequenza della sonda non si sovrappone al sito specifico di riconoscimento del primer, la lunghezza è 46-52 nt, e la sequenza evita la sequenza palindromica, la struttura secondaria interna e le basi ripetute continue. sito di riconoscimento per esonucleasi; Un gruppo fluorescente è contrassegnato a monte del sito THF, un gruppo di spegnimento è etichettato a valle e la distanza tra i due gruppi è 2-4 nt; THF è a circa 15 nt di distanza dall'estremità 3 'e l'estremità 3' è etichettata con un gruppo di blocco, come un gruppo di ammina, un gruppo fosfato o un distanziatore C 3-.
【Composizione del kit】
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Composizione |
COcnt |
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Un buffer |
1,6 ml × 1tube |
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Tampone b |
150 μl × 1tube |
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Reagente |
48T |
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Manuale di guida |
1Copia |
Nota:Considerando il problema della degradazione dell'acido nucleico, i prodotti delle serie di RNA non forniscono modelli di controllo positivi e sonde di primer.
【Specifiche di imballaggio】
- Specifiche: 48 T/pacchetto
【Karchiviazione】
- Condizioni di stoccaggio: Memorizzare a meno o uguale a -20 ºC in un ambiente di temperatura costante. Tieniti lontano dalla luce ed evita una forte pressione.
- Vita di conservazione: 14 mesi.
【Nota】
- I primer/sonde auto-progettati devono essere aggiunti per lo sviluppo del progetto Mira.
- Il kit è disponibile in due tipi: DNA e RNA. Il tipo di RNA include la trascrittasi inversa, consentendo l'amplificazione con RNA, dsDNA e sSDNA come modelli. Il tipo di DNA può amplificare solo con dsDNA come modello.
- Disponibile in tre tipi: striscia di base, fluorescente e di prova. Scegli il kit appropriato in base alle tue esigenze e utilizza i primer/sonde corrispondenti.
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