Questo kit utilizza la tecnologia di amplificazione dell'acido nucleico rapido a temperatura ambiente o una temperatura costante (in genere 39 ° C - 42ºC). La trascrittasi inversa utilizza primer specifici e modelli di RNA per sintetizzare i fili di cDNA. La ricombinasi e i primer, aiutati da proteine ausiliarie e proteine leganti a filo singolo, formano un complesso che cerca e si lega alla regione di omologia target. Ciò si traduce nella formazione di un anello D, che avvia lo scambio di fili. Una volta che la ricombinasi si dissocia, la polimerasi si lega all'estremità 3 'del primer e inizia l'estensione della catena. Con l'azione dell'enzima NFO, viene aggiunta una sonda molecolare specifica, progettata secondo il modello e la tecnologia dell'oro colloidale (metodo sandwich) viene utilizzata per rilevare il risultato finale.
【Caratteristiche】
Elevata sensibilità, forte specificità e breve tempo di reazione (solo 15 minuti) e i componenti di reazione sono in polvere secca, che è facile da usare e facile da conservare.
Questo reagente ha bassi requisiti di attrezzatura e l'operazione di reazione può essere effettuata in bagni di metallo, bagni d'acqua, ecc. E non è necessario acquistare costose attrezzature esclusive come amplificatori PCR.
STrongSpecificità
Questo kit offre prestazioni eccellenti per un'amplificazione precisa dell'acido nucleico.
Reazione rapida
La reazione si completa in soli 15 minuti.
Conveniente
I componenti sono in forma di polvere secca, rendendoli facili da conservare e gestire.
Semplice requato
Adatto per l'uso con attrezzature di base come bagni di metallo o acqua, senza la necessità di costosi amplificatori PCR.
【Design di primer】
Si consiglia di utilizzare primer con una lunghezza di 30-35 bp.Too Short Primer influenzerà la velocità di amplificazione e la sensibilità di rilevamento;la fine 5 'delPrimer inversoè etichettato con un gruppo di modifica (biotina comunemente usata).I primer sono progettati per evitare la formazione di strutture secondarie che influiscono sull'amplificazione; si consiglia la lunghezza dell'amplicone per essere 150-500 bp.
【Design della sonda fluorescente】
Progettare una sequenza di sonda di 46–52 NT, complementare al frammento di destinazione, situato tra i primer a monte e inversi.
- UNTag dell'antigene(in genere fam) è etichettato all'estremità 5 '.
- A dspacer(Tetraidrofuran, THF) è posto al centro della sonda (tra le estremità 5 'e 3'), fungendo da sito di riconoscimento per l'enzima NFO.
- ILFine 3 'è etichettato con un gruppo di modifica, come un gruppo di ammina, un gruppo fosfato o un distanziatore C 3-.
【Composizione del kit】
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Composizione |
COcnt |
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ADrespingente |
1,6 ml × 1tube |
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Tampone b |
150μL × 1Tube |
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Reagente |
48 T |
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Manuale di guida |
1 copia |
Nota:Considerando il problema della degradazione dell'acido nucleico, i prodotti della serie RNA non forniscono modelli di controllo e primer di controllo positivi.
【Specifiche di imballaggio】
- Specifiche: 48 T/pacchetto
【Karchiviazione】
- Condizioni di archiviazione: memorizzare a -20 di grado prima di aprire il pacchetto.
- Shelf Life: 14 mesi.
【Nota】
- I primer/sonde auto-progettati devono essere aggiunti per lo sviluppo del progetto Mira.
- Il kit è disponibile in due tipi: DNA e RNA. Il tipo di RNA include la trascrittasi inversa, consentendo l'amplificazione con RNA, dsDNA e sSDNA come modelli. Il tipo di DNA può amplificare solo con dsDNA come modello.
- Disponibile in tre tipi: striscia di base, fluorescente e di prova. Scegli il kit appropriato in base alle tue esigenze e utilizza i primer/sonde corrispondenti.
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